固相萃取是一个包括液相和固相的物理萃取过程，是一种柱色谱分离过程，其分离机理、固定相和溶剂的选择等方面与高效液相色谱有许多相似之处。固相萃取主要应用于试样的预处理，本文克莱克特就来讲讲固相萃取操作的基本步骤。

固相萃取一般有四个基本步骤：固定相活化，样品上柱，淋洗和分析物洗脱。

（1）活化。活化的目的是创造一个与样品溶剂相容的环境并除去柱内所有杂质。通常需要两种溶剂来完成上述任务，第一个溶剂用于净化固定相，另一个溶剂用于建立一个合适的固定相环境使样品分析物得到释放的保留。

（2）上样。将液态或溶解后的固态样品倒入活化后的固定相萃取小柱，然后利用抽真空、加压或离心的方法使样品进入固定相。为了保留分析物，溶解样品的溶剂必须较弱。如果溶剂太强，分析物将不被保留，结果回收率将会很低，这一现象叫做穿漏。

（3）淋洗。选择合适强度的溶剂，将干扰组分洗脱下来，同时保持分析物仍留在柱上。淋洗溶剂的洗脱强度可略强于或等于上样溶剂，但不能强到可以洗脱任何一个分析物的程度。淋洗步骤也能确保全部样品与固定相接触，因为上样时部分样品溶剂的小液滴可能还沾在管壁上，淋洗溶剂可把液滴全部洗入固定相。

（4）洗脱。淋洗过后，将分析物从固定相上洗脱，洗脱溶剂用量一般是0.5~0.8ml/100mg固定相，而溶剂必须进行认真选择。溶剂太强，一些更强保留的不必要组分将被洗出来；溶剂太弱，就需要更多的洗脱液来洗出分析物，这样固相萃取柱的浓缩功效就会削弱。收集起来的洗脱液可以直接向色谱柱进样，也可以把它浓缩后溶于另一溶剂中进样和进一步净化。